प्रोटीन की क्रोमैटोग्राफी

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क्रोमैटोग्राफी का इतिहास

क्रोमैटोग्राफी शब्द (से यूनानी क्रोमा "द कलर" और ग्रेफीन "राइट") रूसी वनस्पतिशास्त्री मिखाइल त्सवेट से आता है, जिन्होंने 1906 में पेट्रोलियम ईथर का उपयोग करके छोटे कैल्शियम कार्बोनेट से भरे ग्लास कॉलम के माध्यम से पत्ती के अर्क को दबाया, इस प्रकार पिगमेंट को अलग किया। इस शब्द को संभवतः रंगीन बैंडों में खोजा जा सकता है जो अलगाव ("रंग लेखन") के दौरान उत्पन्न हुए थे, लेकिन इसे त्स्वेट नाम से भी प्राप्त किया जा सकता है (कालिख। "रंग" के लिए)।

क्रोमैटोग्राफी की शुरुआत में ऐसी प्रक्रियाएं थीं जिन्हें पेपर क्रोमैटोग्राफी के अग्रदूत के रूप में माना जा सकता है। 1834 में, एफ. एफ. रनगे ने फिल्टर पेपर का उपयोग करके डाई मिश्रण को अलग किया ("रंग रसायन पर: सुंदर के दोस्तों के लिए नमूना चित्र"); 1851 में शोएनबेन और गोपेल्सरोएडर ने फिल्टर पेपर स्ट्रिप्स पर नमक के घोल के व्यवहार की जांच की।

1931 में लेडरर, कुह्न, विंटरस्टीन और हेस्से ने हाइड्रोफिलिक और रंगहीन यौगिकों के लिए भी स्वेट की विधि का उपयोग करने में सफलता प्राप्त की।

इज़मेलो और श्राइबर (1938) ने पतली परत क्रोमैटोग्राफी के लिए पहली विधि विकसित की, जिसमें पेपर क्रोमैटोग्राफी पर कई फायदे थे। 1941 में ए. जे. पी. मार्टिन और आर. एल. एम. जल-संतृप्त सिलिका जेल वाले स्तंभों पर ऊन हाइड्रोलाइज़ेट्स से अमीनो एसिड के मिश्रण को सिंक करते हैं। हालांकि, कम आणविक भार वाले पदार्थों के पृथक्करण के लिए पहली क्रोमैटोग्राफी सामग्री प्रोटीन की क्रोमैटोग्राफी के लिए पूरी तरह से अनुपयुक्त थी, क्योंकि इन सामग्रियों, जैसे कि पॉलीस्टाइनिन-आधारित आयन एक्सचेंजर्स, में बिल्कुल ऐसे गुण होते हैं जो प्रोटीन के पृथक्करण के लिए अवांछनीय होते हैं:

वे बहुत दृढ़ता से परस्पर जुड़े हुए हैं और केवल छोटे अणुओं को प्रवेश करने की अनुमति देते हैं, लेकिन उच्च आणविक भार वाले प्रोटीन को नहीं
और वे प्रोटीन के साथ हाइड्रोफोबिक और आयनिक बातचीत में प्रवेश करते हैं

प्रोटीन क्रोमैटोग्राफी के लिए सेल्युलोज, अगारोज और कार्बोहाइड्रेट पॉलिमर पहली क्लासिक सामग्री थे, लेकिन उच्च दबाव पर agarose डेरिवेटिव का उपयोग नहीं किया जा सकता है। इसलिए एचपीएलसी प्रक्रिया के लिए कई अन्य सामग्री विकसित की गई हैं जो दबाव में भी अपनी छिद्रपूर्ण संरचना को बरकरार रखती हैं।